Нингидриновая реакция

Эта реакция используется для количественного определения аминокислот колориметрическим методом.

При кипячении водных растворов (или дисперсий) белка с трикетогидринденгидратом (нингидрином)

происходит их окрашивание в красивый синий цвет.

Вопрос. Какие реакции протекают при взаимодействии нингидрина с белком?

Ответ. Нингидрин является сильным окислителем. При действии нингидрина на NН₂-содержащие заместители при С_α-атомах полипептидной цепи, а также на концевые NН₂-группы происходит процесс дезаминирования с превращением в соответствующий альдегид. Эта реакция сопровождается количественным выделением СО₂:

356

Образующееся аминопроизводное нингидрина взаимодействует с другой молекулой нингидрина, образуя дикетогидринимин (пурпур Рухемана).

Нингидрин может реагировать также с группой бокового радикала Arg. Кроме того, он способен окислять HS-группу Cys и регенерировать связи -S-S- в белковом субстрате.

357